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东方墨點法

东方墨點法()是一个用于稱呼分析蛋白质修饰(包括脂质、磷酸根和糖缀合物的添加)的多种生化技术名称。大多数被称为“东方墨點法”的技术都是将十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上的磷蛋白印迹到聚偏二氟乙烯或硝酸纤维素膜上。並使用探针分析转移蛋白的修饰,这些探针可以检测脂质、醣類、磷酸化或任何其他蛋白质修饰。东方墨點法是指通过修饰与探针的特异性相互作用来检测目标的方法,这与标准的远端西方墨點法有所区别。从原理上讲,东方墨點法与凝集素墨點法类…

真空蒸馏

在189°C沸腾,瓶内处于真空状态,接受瓶只有70°C]] 真空蒸馏是种使待分离液体上方压强小于其蒸汽压的蒸馏方法。这方法适用于蒸汽压大于环境压力的液体。待分离液体沸点降低,真空蒸馏不一定需要加热。 实验室 实验室將真空蒸馏用于沸点太高或温度接近沸点时易起反应的液体。β-胡萝卜素等对高温敏感的物质須以真空蒸馏分离,可防止高温造成的化学反应。真空蒸馏比普通蒸馏有更少残留物。 工业 工业真空蒸馏有几項优点 ,沸点相近的混合物可能需要多級平衡…

同位素标记

同位素标记是一项用于追踪同位素在某个化学反应、代谢通路、或细胞定位中的路径和去向的技术。在使用时,通过把特定的反应物分子中的某个原子替换为其同位素来进行“标记”,再让标记过后的反应物发生反应,产物分子中同位素标记的位置就反映了反应过程中被标记原子的变化。在同位素标记中使用的核素可以是稳定核素,也可以是放射性核素,在后面这种情况中,特称放射性示踪技术。 在同位素标记技术中,检测同位素标记的方法有很多种。质谱可以用于检测不同同位素的质量差异…

光鑷

光鑷、光學鑷子或光鉗(英文:optical tweezers)是一種通過高度聚焦激光束产生力(量级通常为皮牛顿级)移動微小透明物體的裝置。其中把持物體的區域也稱爲光阱 (optical trap),相應的技術稱作光學捕捉 (optical trapping)。這種技術可以用於移動細胞或病毒顆粒,把細胞捏成各種形狀,或者冷卻原子。由于光镊的力可以精准地直接作用于细胞甚至更小的目标,因此在生物学方面的应用變得越来越广泛。 光镊原理 基本原理…

荧光共振能量转移

5'-三磷酸 水解酶 ARF 显示蛋白在活巨噬细胞里位于高尔基体。]] 荧光共振能量转移(),是描述两个生色团之间能量转移的一种机制。 激发态上的供体生色团,有可能通过偶极耦合将能量传递给受体生色团(两者距离通常在1nm附近)。 福斯特能量共振转移(FRET)类似于近场传输,即反应的作用距离远小于激发光的波长。在近场区域,激发态的供体生色团发射虚拟光子,光子旋即被受体发色团吸收。该些光子是无法探测的,因为他们的存在违反了能量和动量守恒。…

简单重复序列间多态性

在分子生物学中,简单重复序列间多态性()具有两种含义:一是DNA分子由于核苷酸序列中的不同而产生的的一種可以用来相互区别的性质;二是一种实验技术,利用这种性质来比较不同的DNA分子在多态性上的差异。 原理 在基因组中存在着大量的重复序列,根据其重复的程度可分为简单重复序列、中度重复序列和高度重复序列。简单重复序列(Simple Sequence Repeat,SSR)在真核生物基因组中广泛存在,一般是以1-6bp组成较低程度的重复序列,…

膜片钳

]] 膜片钳技术()是一种电生理学实验技术,用于研究组织切片、单个或一小块细胞膜的离子电流。这项技术可应用于研究可兴奋细胞(excitable cells),比如神經元、、肌细胞和胰島β细胞,也可以应用于细菌特别是制备的大型原生质球上的离子通道研究。 膜片钳技术可以有电压钳和两种设置,在电压钳中,设备通过负反馈电路维持细胞跨膜电位在某一数值来观察跨膜电流的变化,而在电流钳中,微电极向细胞内注入恒定或变化的电流,记录相应膜电位的变化,如动…

柱色谱法

-{zh-hans:柱色谱法;zh-tw:管柱層析法}-(,又稱為柱层析,俗称过柱子)是一种制备性色谱(Preparative chromatography),在化学中是最为常用的从混合物中分离纯净物的分离方法。不同分子具不同大小、電荷、附著力,這些差異可以幫助分离从毫克到公斤级别的产物。柱色谱的主要优点是相对的低成本和可处理的固定相,选用的固定相可以避免重复利用的交叉污染和固定相的分解。 操作 常见的制备性色谱柱是直径5mm至50mm…

尺寸排除色谱法

尺寸排除色谱法(,縮寫:SEC),也称为分子筛色谱法, 是一种将溶液中的分子按其大小(在某些情况下为分子量)分开的色谱法。 这种方法通常被用于分离大分子或高分子复合物(例如蛋白质和工业聚合物)。当使用水溶液将样品运输通过色谱柱时,该技术通常称作凝胶过滤色谱法,而不是叫做(用有机溶剂作流动相时使用的技术才叫凝胶渗透色谱法)。色谱柱中装有细小的多孔珠,它们的成分是葡聚糖聚合物(Sephadex)、琼脂糖(Sepharose)或聚丙烯酰胺(S…

電移位切試驗

電移位切試驗(英语:Electrophoretic mobility shift assay)是一種分子生物學試驗,用来檢測蛋白質有没有和核酸發生親和作用。試驗將没有放入核酸的蛋白質和放入核酸的蛋白質作比較,經過凝膠電泳,體積比較大的分子會移動得比較近,而體積比較小的分子會移動得比較遠。通過觀察分子在凝膠中移動形成的條紋,可以知道蛋白質有没有和核酸發生親和作用。

空气隔绝技术

空气隔绝技术(Air-free techniques)指的是在化学实验室中操作使用空气敏感化合物时所使用的一系列技术手段。目的是为了防止相关化合物和空气组分接触,通常是水和氧气,亦可以是二氧化碳和氮气,从而发生反应而变质。常用手段为营造真空环境,并使用惰性气体进行保护,例如氩气或氮气。 最常用的两种空气隔绝装置为手套箱和舒伦克线,两种装置都可以用于干燥除空气。在两种方法中,玻璃仪器(一般为舒伦克瓶)使用前都要预先在烘箱中干燥。也可以使用…

检验科

检验科()的主要工作是承担各个病房、急诊病人的各类检查工作。 检查项目 生化检查 #生化全项检查 #肝功能检查 #肾功能检查 #糖尿病监测 #血脂检查 #心肌损伤相关指标检测 #贫血检查 #离子检查 #微量元素检查 免疫检查 #感染疾病检查 #病毒标志物检查 #肿瘤标志物检查 #特种蛋白检查 #自身抗体检查 #骨代谢类 #激素检查 微生物检查 #幽门螺杆菌检查:C14-呼气试验 真菌培养 厌氧菌培养 #L型细菌培养 #普通细菌培养 #淋…

單細胞分析

的過程,這些就是研究者想要量化的所有步驟(DNA、RNA、蛋白質)。]] 在細胞生物學中,單細胞分析()是在單一細胞層級上的基因體學(genomics)、轉錄體學(transcriptomics)、蛋白質體學(proteomics)與代謝體學(metabolomics)的研究。因為原核與真核細胞的族群皆有異質性,所以分析單一細胞可能發現研究整個細胞族群時無法觀測的機制。 螢光激發的細胞分選(FACS)之類的科技可將被選取的單一細胞從複雜…

遞減聚合酶鏈式反應

遞減PCR,亦稱降落PCR()是一種PCR(聚合酶鏈式反應)方法,用來避免非特異性序列的擴增。PCR中引物的黏合溫度()決定了黏合的特異性,溫度越高特異性越強,但過高則不能實現引物和模板的結合,而過低會產生大量非特異性產物。因此進行PCR時需要尋找合適的黏合溫度。 遞減PCR開始先設定一個比較高的黏合溫度,每個循環黏合溫度下降1℃,到一個較低溫度以後每個循環的黏合溫度保持不變直到結束。在剛下降到特異性結合可以進行的最高溫度時,可以達到最…

MS培养基

MS培养基为細胞和植物組織培養最常见的培养基之一,由威斯康星大学的和所研发并用于植物激素的研究。培养基以两人的姓氏首字母命名,并以数字表示培养基中蔗糖的浓度值(例如,MS0表示培养基中无蔗糖,而MS20表示培养基蔗糖浓度为20克/升)。目前MS培养基被各地研究者加以改进,被广泛运用于植物组织培养中。 发现过程 村重敏夫时为威斯康星大学博士研究生,师从瑞典裔科学家斯科格从事植物激素的研究。村重最初试图从烟草汁液中分离某种激素,但并未获得成…

傾析

傾析,是用來分隔液體和固體的方法之一,簡言之就是把容器內位在上方的液體傾倒出來,並讓固體留在底下。例如洗米時,米和洗米水就是如此分開。這種方法必定有少量液體殘留在容器內。它的好處是方便簡單。使用此方法時,固體的密度必須比液體大,而且不溶於液體,通过重力将密度大的固体缓缓沉积到混合物的底部,以此将固液分离。当两相密度差不大或固体沉积速度较缓时,可以用离心机加速沉积。 倾析也可以用于分离两个互相不溶的液体,然而其效果不如使用分液漏斗。 参见…

革蘭氏染色

的金黃色葡萄球菌(ATCC 25923 菌株),粉紅色者為陰性的大腸桿菌(ATCC 11775 菌株)]] 革蘭氏染色()或称革兰氏染色法(),是用來鑑别細菌的一種方法,该染色法利用細菌細胞壁上的生物化学性质不同,可將細菌分成兩類,即革蘭氏陽性()与革蘭氏陰性()。这一染色方法由丹麥醫生汉斯·克里斯蒂安·革兰於1884年所發明,最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關係,后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一,对由细菌感染引起的疾病的…