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气相色谱法

气液色谱法(,又称气相层析)是一种在有机化学中对易于挥发而不发生分解的混合物进行分离与分析的層析技术。气相色谱的典型用途包括测试某一特定化合物的纯度与对混合物中的各组分进行分离(同时还可以测定各组分的相对含量)在某些情况下,气相色谱还可能对化合物的表征有所帮助。在微型化学实验中,气相色谱可以用于从混合物中制备纯品。 气相色谱中的流动相(或活动相)是载气,通常使用惰性气体(如氦气)或反应性差的气体(如氮气)。固定相则由一薄层液体或聚合物附…

色谱法

-{zh-cn:色谱法;zh-hk:色譜法;zh-tw:色層分析法}-()-{zh-cn:又称层析法;zh-hk:又稱層析法;zh-tw:簡稱層析法、層析,又稱色譜法}-,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质(组分)沿固定相移动的速率不同,最终达到分离的效果。 色谱法起源于20世纪初,1950年代之后…

理论板

在许多分离过程中,理论板是一个假设的区域或阶段。在此区域内,物质的两相(如气相与液相)彼此达到平衡状态。这种平衡阶段也被称为平衡级、理想级或理论塔板。许多分离过程的运行性能取决于是否拥有一系列连续的平衡级,且增加此类平衡级的数量能够有效提升分离效果。换言之,增加理论板的数量可以提高分离过程的效率,无论该过程是蒸馏、吸收、层析、吸附还是其他类似的过程。 应用 理论板和塔板(或平衡级)的概念被广泛应用于许多不同类型分离过程的设计中。在工业规…

柱色谱法

-{zh-hans:柱色谱法;zh-tw:管柱層析法}-(,又稱為柱层析,俗称过柱子)是一种制备性色谱(Preparative chromatography),在化学中是最为常用的从混合物中分离纯净物的分离方法。不同分子具不同大小、電荷、附著力,這些差異可以幫助分离从毫克到公斤级别的产物。柱色谱的主要优点是相对的低成本和可处理的固定相,选用的固定相可以避免重复利用的交叉污染和固定相的分解。 操作 常见的制备性色谱柱是直径5mm至50mm…

尺寸排除色谱法

尺寸排除色谱法(,縮寫:SEC),也称为分子筛色谱法, 是一种将溶液中的分子按其大小(在某些情况下为分子量)分开的色谱法。 这种方法通常被用于分离大分子或高分子复合物(例如蛋白质和工业聚合物)。当使用水溶液将样品运输通过色谱柱时,该技术通常称作凝胶过滤色谱法,而不是叫做(用有机溶剂作流动相时使用的技术才叫凝胶渗透色谱法)。色谱柱中装有细小的多孔珠,它们的成分是葡聚糖聚合物(Sephadex)、琼脂糖(Sepharose)或聚丙烯酰胺(S…

液相色譜法-質譜聯用

液相層析法-質譜聯用(,英文缩写LC-MS)是一種將液相層析(Liquid chromatography,簡稱LC)的物理分離能力和質譜(mass spectrometry,簡稱MS)的質量分析能力結合起來的分析化學技術。LC-MS是一項具有非常高的敏感度和選擇性的非常強而有力的分析技術,它使用於很多的領域。一般說來,它的使用方向是在多種其他化合物存在的複合混合物中,測出各種組分並有可能確定其詳細結構。 LC-MS在尿液中藥物篩選分析中…

凝胶渗透色谱法

凝胶渗透色谱法(,简称GPC)是尺寸排除色谱法(SEC)的一种。它通过多孔非吸附性的凝胶,将有机溶剂中的分析物分子按照分子的尺寸进行分离。1964年道化学公司的J.C. Moore在研究体积排除色谱时发明了GPC。在表征聚合物时,分子量、分子量分布和分散性是很重要的指标。通过结合其它数据,凝胶渗透色谱法可以测定聚合物的数均分子量 (Mn)、重均分子量 (Mw)、Z均分子量(Mz)和粘度分子量(Mv)。故今日的GPC系统经常和其它表征仪器…

高效液相色谱法

高效液相色谱法(,縮寫 HPLC),又譯-{zh-cn:高效液相层析法;zh-hk:高效液相層析法;zh-tw:高效液相色譜法}-,以前曾指高壓液相層-{}-析法(high pressure liquid chromatography),是一種色譜分析技術,用來分離混合物,以確認並量化各個成分的比例。它依賴泵加壓樣品以令其通過填充有吸附劑的壓力柱,導致樣品的各個成分因而分離。高效液相色谱法常用於生物化學和分析化學。 历史 1960年代,…

色谱学史

色谱法的历史起源于19 世纪中叶,至今仍在发展。 色谱法,字面意思是“颜色书写”,在 20 世纪的第一个十年中被使用并命名,主要用于分离植物色素,例如叶绿素(绿色)和类胡萝卜素(橙色和黄色) 。 1930 年代和1940 年代开发的新型色谱法使该技术可用于广泛的分离过程和化学分析任务,特别是在生物化学领域。 史前史 弗里德利布·龙格 色谱法的最早使用是将混合物通过惰性材料,根据吸附差异来分离溶液成分,有时归功于德国化学家弗里德利布·费迪…

塞法戴克斯

塞法戴克斯()是一个用于凝胶过滤的交联右旋糖酐凝胶的商标。在经杰克尔·波拉斯与泊·弗洛丁的研发工作后,它首次由Pharmacia(法玛西亚)于1959年上市。此名称源于:separation(分离)Pharmacia(法玛西亚)dextran(右旋糖酐)。通常情况下,生产出来的形状是小珠状且常用于凝胶过滤柱中。通过改变交联程度,凝胶的过滤性质也被改变。 这些高度专化的凝胶过滤与色谱介质是由肉眼可见的小珠所组成,它们合成来自于一种叫右旋糖…

薄层色谱法

薄层色谱法(,简称TLC,又称为-{zh-cn:薄层层析;zh-hk:薄層層析;zh-tw:薄層色譜法}-)是一种用于分离混合物的層析技术。在分析化學特別是针对有機化合物的分析中,薄层層析是極為重要的分離方法。 薄层層析在覆盖有很薄一层吸附劑的玻璃板、塑料片或铝箔上进行。吸附劑又称为薄層色譜固定相:常為硅胶、氧化铝或纤维素。操作時先将待分离样品用毛細管点于板上,然後在密閉的層析缸中,用單一或混合溶剂作為流動相,由流动相的毛细作用缓慢地將…

范第姆特方程

范第姆特方程()在色谱学中是综合考虑了分离过程中引起峰展宽的物理因素、动力学因素和热力学因素后得到的单位柱长的总峰展宽与流动相流速的关系式。一般来说,影响峰展宽的因素包括多路径效应,扩散(径向的和轴向的)与固定相和流动相间的传质阻力。液相色谱中的流动相流速常取出口的流速,即体积流量与柱横截面积之比。对于填充柱来说,通常取出口横截面积为柱横截面积的0.6倍。另一种方法是用柱长与死區时间(※結束時間)的比。如果流动相是气相,还要进行温度与压…

弗罗因德利希方程

弗罗因德利希方程(,或称为弗罗因德利希吸附等温线)是吸附等温线其中的一种,吸附等温线建立了吸附在吸附剂上溶质的浓度与在液相中溶质的浓度两者之间的关系。1909年,赫伯特·弗罗因德利希提出了一个经验表达式用以表示每单位质量固体吸附剂上已吸附气体的量与气体压力这两者之间的等温变动。该方程亦被称为弗罗因德利希吸附等温线或弗罗因德利希吸附方程。大体上来说,有两种类型广为接受的吸附等温线:弗罗因德利希吸附等温线与朗缪尔吸附等温线。将被吸附物质的质…

反相色谱法

逆向層析(,RPC)包含了任何一种使用非极性固定相的色谱学方法。“反相”这个词有着其历史背景。在1970年代,大多数液相色谱是在未修饰的氧化硅或氧化铝上完成的,他们表面的化学性质是亲水性的,对于极性化合物具有更强的亲和力,因此也叫做“正相”(正常)色谱。若采用烷基链共价键合到支持表面上,则会倒换洗脱顺序。在反相色谱法中,极性化合物先被洗脱出来,而非极性化合物被保持住,因为它们亲和于反相表面。在其他色谱方法中所使用的所有数学与试验研究在反…

分配常数

分配常数(,或称为分配系数)是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。对一种特定溶质来说,分配常数等于它在固定相中的摩尔浓度与其在流动相中的摩尔浓度之比率,亦近似等于溶质在两相中溶解度之比。该术语常会与分配系数混淆在一起,分配常数常被表示为KD。 表达式 一种溶质A在水溶液/有机溶液中的活度的比,而该水溶液/有机溶液系统的情况要维持稳定,而且不受A的总量所影响(所以[A]_{org} \propto [A]_{aq}),那么在任何给…

亲和色谱法

亲和色谱法(,又称为亲和层析)是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。亲和色谱在凝胶过滤色谱柱上连接与待分离的物质有一定结合能力的分子,并且它们的结合是可逆的,在改变流动相条件时二者还能相互分离。亲和色谱可以用来从混合物中纯化或浓缩某一分子,也可以用来去除或减少混合物中某一分子的含量。 原理 利用生物大分子和固定相表面存在的某种特异性亲和力,进行选择性分离。亲和色谱常用的生物分子相互作用有: 一般流程 亲和色谱分离的通常是混合在…

保留因子

在色谱法中,保留因子(R)定义为被分析物在色谱体系流动相中的分数。特别的,在平面色谱法中,保留因子(Rf)定义为一点中心运动距离与溶剂前沿运动距离的比值。理想条件下,Rf 的值等于柱色谱中的R值。 通用定义 在色谱法中保留因子R,是在稳态下样品在流动相中的分数,定义为: :\ R = \frac{\mbox{quantity of substance in the mobile phase}}{\mbox{total quantity …

电色谱

电色谱是分析化学、生物化学和分子生物学中的一种化学分离技术,用于分离大部分大型生物分子,例如蛋白质 。它是尺寸排除色谱法 (凝胶过滤色谱)和凝胶电泳的组合。这些分离机制基本上是沿着添加了轴向电场梯度的凝胶过滤柱的长度方向进行叠加的。 由于凝胶过滤机理,分子按大小分开,由于凝胶电泳机理,分子按电泳迁移率分开。 此外,还有二级色谱溶质保留机制。 毛细管电色谱 毛细管电色谱(CEC)是一种电色谱技术,其中液相流动相通过电渗作用通过包含色谱固定…

离子色谱法

离子色谱法(或离子交换色谱法)是一种根据离子和可电离极性分子与离子交换剂不同的的亲和力来分离它们的方法。它适用于大部分类型的带电分子,包括小无机阴离子、大蛋白质分子、小核苷酸、和氨基酸。然而,离子色谱法必须在距离蛋白质等电点1个pH单位的条件下进行。 历史 离子色谱法通过多年的经验积累而逐步发展。自1947年,Spedding和Powell开始使用置换离子交换色谱法分离稀土。此外,他们还展示了氨中14N和15N同位素的离子交换分离。20…