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定量相位成像

定量相位成像(Quantitative Phase Imaging, 簡稱 QPI),是一種無標記(Label-free)的顯微成像技術,能夠量化光波穿透或反射樣品時產生的相位延遲(Phase delay)。由於許多生物細胞或透明材料(如相位標靶)在光學上屬於相位物體(Phase objects),傳統的明視野顯微鏡難以觀察其內部對比。QPI 藉由干涉測量術擷取光波的振幅與相位資訊,並高度仰賴數位訊號處理(DSP)技術將干涉圖轉換為具備…

双光子激发显微镜

。 绿色:细胞核。 蓝色:杯状细胞粘液。 通过钛-蓝宝石激光器在波长780 nm处激发获得。]] 根茎横断面彩色的双光子图象。 激发在840nm处,记录并叠加三个颜色通道。]] 双光子激发显微镜()是一种荧光成像技术,可以对活体组织进行深度约1毫米的成像。 它不同于传统的荧光显微镜,其中激发波长短于发射波长,因为两个激发光子的波长长于所得发射光的波长。 双光子激发显微术通常使用近红外激发光,其也可以激发。 然而,对于每次激发,两个光子的…

GCaMP

GCaMP是一种基因编码钙指示剂(GECI),最初由中井淳一于2001年开发。 它由绿色荧光蛋白(GFP)、钙调蛋白(calmodulin,CaM)和源自肌球蛋白轻链激酶的肽序列M13通过人工融合构成。 当与Ca2+结合时,GCaMP会发出绿色荧光,其激发峰波长峰值为480 nm,发射峰波长约为510 nm。 在生物学研究中,GCaMP被广泛用于测量体外和体内细胞内Ca2+水平,通常通过病毒转染或在转基因细胞系与动物品系中表达。 GCa…

荧光共振能量转移

5'-三磷酸 水解酶 ARF 显示蛋白在活巨噬细胞里位于高尔基体。]] 荧光共振能量转移(),是描述两个生色团之间能量转移的一种机制。 激发态上的供体生色团,有可能通过偶极耦合将能量传递给受体生色团(两者距离通常在1nm附近)。 福斯特能量共振转移(FRET)类似于近场传输,即反应的作用距离远小于激发光的波长。在近场区域,激发态的供体生色团发射虚拟光子,光子旋即被受体发色团吸收。该些光子是无法探测的,因为他们的存在违反了能量和动量守恒。…

绿色荧光蛋白

綠色螢光蛋白(,簡稱GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白質,從藍光到紫外线都能使其激發,發出綠色螢光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但傳統上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从維多利亞多管發光水母中分离的蛋白质。這種蛋白質最早是由下村脩等人在1962年在維多利亞多管發光水母中發現。這個發光的過程中還需要冷光蛋白質水母素的幫助,且這個冷光蛋白質與鈣離子(Ca2+)可產生交互作用。 在維多利亞多管發光水母中發現的野生型綠色…

全內反射螢光顯微鏡

全内反射荧光显微镜(,TIRFM),利用光線全反射後在介質另一面產生衰逝波的特性,激發荧光分子以觀察螢光標定樣品的極薄區域,觀測的動態範圍通常在200nm以下。因為激發光呈指數衰減的特性,只有極靠近全反射面的樣本區域會產生螢光反射,大大降低了背景光雜訊干擾觀測標的,故此項技術廣泛應用於細胞表面物質的動態觀察以及动态单分子荧光成像。 全反射荧光显微镜的激发方式分为物镜式(Cis)和棱镜式(Trans)。在物镜式显微镜中,激发光束直接穿过物…

显微图谱

《微物圖誌》(,又译为《-{zh-cn:微物图志;zh-tw:顯微圖譜}-》、《显微制图》、《显微术》、《显微镜图集》、《显微镜图像》、《显微图志》、《微观图集》等),是罗伯特·胡克的一本具有历史意义的著作,讲述了他通过各种镜头进行的观察。这是第一本包含通过显微镜看到的昆虫和植物插图的书。 该书于1665年1月出版,是皇家学会的第一本重要出版物,成为第一本科学畅销书,激发了公众对显微镜这门新兴科学的广泛兴趣。该书创造了生物学术语“细胞”…

光漂白

光漂白(,亦称为光致褪色)是一個對螢光團的光化學破壞。在显微术中,光漂白使得觀測變得很複雜,因為它會造成破壞,使螢光團無法繼續放光。此現象造成間歇性拍攝光譜(time-lapse microscopy)觀測上的干擾。 然而,光漂白也提供了些應用在quench自发荧光上(主要在antibody-linked)。這可以幫助提高信噪比signal-to-noise ratio。 光漂白也用來研究分子運動和分子擴散現象,像是FRAP或FLIP技…

共聚焦显微镜

共聚焦显微成像技术()是一种利用逐点照明和空间针孔调制来去除样品非焦点平面的散射光的光学成像手段,相比于传统成像方法可以提高光学分辨率和视觉对比度。 商业化的共聚焦顯微鏡()分三类: 共聚焦激光掃描顯微鏡() 转盘共聚焦顯微鏡() 可编程序阵列顯微鏡() 基本原理 從一個點光源發射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上,如果物體恰在焦點上,那麼反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡稱共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一…

共聚焦激光掃描顯微

共聚焦激光扫描显微(英語:Confocal laser scanning microscopy,CLSM,LCSM)是一项高分辨率三维光学成像技术。主要特点在于其光学分层能力,即获得特定深度下焦点内的图像。图像通过逐点采集,以及之后的计算机重构而成。因此它可以重建拓扑结构复杂的物体。对于不透明样品,可以进行表面作图,而对于透明样品,则可以进行内部结构成像。内部结构成像上,图像品質在单台显微镜中就可以得到极大的提升,因为来自样品不同深度的…

熒光顯微鏡

BX61螢光顯微鏡,在物镜上面有荧光滤光块转盘,联接数码相机。]] 的荧光顯微鏡物鏡]] 荧光顯微鏡是一種使用荧光或磷光物質的光學顯微鏡,或除此之外使用反射和吸收用於研究的有機或無機物質的特性。“荧光顯微鏡”是指使用荧光來產生一個圖像的任何顯微鏡,無論是更簡單的設置像落射螢光顯微鏡,或更複雜的設計如共聚焦顯微鏡,其使用,以獲得分辨率更高的荧光圖像。 2014年10月8日,諾貝爾化學獎頒給了艾力克·貝齊格,威廉·莫爾納爾和斯特凡·赫爾,表…