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塞法戴克斯

塞法戴克斯()是一个用于凝胶过滤的交联右旋糖酐凝胶的商标。在经杰克尔·波拉斯与泊·弗洛丁的研发工作后,它首次由Pharmacia(法玛西亚)于1959年上市。此名称源于:separation(分离)Pharmacia(法玛西亚)dextran(右旋糖酐)。通常情况下,生产出来的形状是小珠状且常用于凝胶过滤柱中。通过改变交联程度,凝胶的过滤性质也被改变。 这些高度专化的凝胶过滤与色谱介质是由肉眼可见的小珠所组成,它们合成来自于一种叫右旋糖…

表面等离子共振

位于电导率正负不同材料界面上(实际情况下多在导体表面)的表面等离子),在入射光刺激下发生共振的现象叫做表面等离子共振()。当这一现象具体发生在纳米尺寸金属结构表面时,也被称作局域表面等离子共振()。 它被用来设计在金属平面或金属纳米颗粒表面材料吸附情况的标准化测量工具,也是芯片实验室传感器,多种基于颜色的生物传感器,和硅藻光合作用的理论基础。 当入射光通过棱镜等在金属表面发生全反射时,倏逝波会与表面等离子波耦合产生共振。 解释 表面等离…

磷酸盐缓冲生理盐水

磷酸盐缓冲生理盐水(,简称为PBS)是生物学研究中常用的缓冲液。这是一种以水为溶剂的含磷酸钠的盐溶液,在某些配方中还加入了氯化钾及磷酸钾。该溶液的与离子浓度与人体中的是相符的。 应用 因其等张且对细胞无毒性,PBS非常常用。用法包括:稀释物质及清洗细胞容器。含EDTA的PBS亦常用于解开贴壁及成团的细胞,而不能加入如锌等的二价金属,因为这样会导致沉淀。针对不同的应用,常使用。 配制 配制PBS的方法有多种。一些配方不含钾离子,而另一些配…

RNA提取

RNA提取()即从生物学样品中纯化RNA。该步骤的麻烦点在于:细胞与组织中的遍布着核糖核酸酶,这种酶可迅速降解RNA。用于分子生物学的从样品中分离RNA的方法有多种,最常用的方法之一是硫氰酸胍-酚-氯仿提取。 通常使用研钵及研杵或专业电动研磨器在液氮中提取RNA,也是阻止核糖核酸酶的有效方法。 另见 DNA提取 酚-氯仿提取 乙醇沉淀 基于旋转柱的核酸纯化 参考文献

MTT試驗

細胞存活率分析 (,全名:(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide),是一種用於測量細胞的活性之試驗。 ]] 原理 MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用於活細胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶(SDH)和細胞色素C的作用下四氮唑環會開裂,生成紫色的甲䐶結晶,利用DMSO將甲䐶溶解出來之後,再利用吸光度的測定去評估有多少細胞存活。因為甲䐶結晶的…

透析 (生物化學)

在生物化学中, 透析(Dialysis)过程是利用不同分子擴散性質的差異而分離溶液中的分子 ,通常藉由一層半渗透膜(如透析管)工具達成。 透析是常見的实验室技术,與醫學上人工透析(洗腎)使用同樣的原理。透析常用於去除不需要的小分子,例如盐,還原劑、染料並保留较大分子,例如 蛋白质, DNA,或者多糖。 透析也時常被用于緩衝液交換和药物研究。 透析流程 参考文献 参看 渗析 血液透析 渗透 腹膜透析

氯甲酸-9-芴甲酯

氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC-Cl)是9-芴甲醇的氯甲酸酯。它用於使芴甲氧羰基(FMOC group)形成芴甲氧羰基氨基甲酸酯FMOC carbamate。 製備 氯甲酸-9-芴甲酯可以由9-芴甲醇和碳醯氯反应製備: : 反應 FMOC carbamate通常作為胺的保護基。例如:Fmoc-Cl的Fmoc基團會與胺基作用。 : 其他常見製備芴甲氧羰基(Fmox group)的方法是透過9 - 芴基甲基琥珀酰亞胺基碳酸酯 9-fluore…

等温滴定量热法

等温滴定量热法(isothermal titration calorimetry,ITC)在化学热力学中,是一种物理技术,用于确定溶液中相互作用的热力学参数,最常用于在无标记环境中研究小分子(如药用化合物)与大分子(蛋白质、DNA等)的结合。由两个封闭在绝热夹套中的样品池组成。要研究的化合物被放置在样品池中,而另一个样品池,即参比池,则用作对照,内含溶解样品的缓冲液。 该技术由H. D. Johnston于1968年开发,是他在杨百翰大…

1-羟基苯并三唑

1-羟基苯并三唑(HOBt),白色晶体,是苯并三唑的1H-N被羟基取代的衍生物。常用作多肽合成中的外消旋化抑制剂。经典方法用DCC脱水缩合制肽时,由于DCC活性很高,常使底物的手性中心无法在产物中很好地保持。一般加入羟基苯并三唑等助剂以降低活化酯的活性,从而抑制外消旋化。详见多肽合成一文。 1-羟基苯并三唑通常都是以单水合物结晶(~11.7%水,重)出售的。无水1-羟基苯并三唑有爆炸性,使用时需注意。 参考文献

HA標籤

HA標籤(HA-tag)是一種基於人流感病毒血凝素(Human influenza hemagglutinin)抗原的蛋白標籤,其化學本質爲一段來自人流感病毒血凝素98-106號氨基酸的短氨基酸序列。使用分子生物學手段將HA標籤序列接合到目的蛋白的一端後,就可以使用抗HA標籤的特異性抗體結合該重組蛋白,利於免疫組織化學(IHC)、Western Blotting等實驗的進行。 序列 HA標籤的氨基酸序列是:YPYDVPDYA(Y=Tyr…

微透析

希斯塔。]] 微透析是一種微創的採樣技術,幾乎可以在任何組織的細胞外液中,連續測量游離、未結合的目標受質濃度。目標受質可以是内源性分子(像神经递质、激素、葡萄糖等),透析目的是評估相關生物機能,也可以是外源性分子(像藥品),用透析來量測在體內的濃度。微透析的技術需要插入小的微透析导管(也稱為微透析探針)到要分析的部位。微透析导管的設計模仿微血管,其軸的尖端有半透的中空纖維膜,其连接到入口管和出口管。导管處會持續的灌注水溶液(灌注液),其…

免疫分析

免疫分析(Immunoassay)又称免疫测定,是一种利用抗体或抗原对某种溶液中的大分子或小分子进行测量的生物化学实验技术,其本质是抗原-抗体的结合反应,当抗原遇到其相应的特异抗体时产生一系列的抗原-抗体反应,形成抗原-抗体结合物。饱和分析(saturation assay)是一种免疫分析,其为抗原和抗体反应达到结合与解离平衡且饱和状态下的(放射)免疫分析。 现今的免疫分析多使用“免疫标记分析技术”,可分为:放射物标记、酶标记、发光标记…

溫度梯度凝膠電泳

溫度梯度膠體電泳(temperature gradient gel electrophoresis, TGGE)是電泳技術的一種,通過物質在不同溫度下性質的區別進行分離。 TGGE是一種有效的分離DNA、RNA或者蛋白的手段。它利用了不同分子在溫度改變下構象的差別進行分離。另外一種類似的技術是變性梯度膠體電泳(denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE),則是利用不同分子在不同濃度的變性劑…