引物
引子()又称-{zh-cn:引子;zh-tw:引物}-,是一小段單鏈核酸(亦可稱為寡核苷酸),含游离3′-羟基,並可引发聚合反应。引子可為DNA或RNA,參與DNA複製的起始步驟。DNA複製過程中,由於DNA聚合酶只能將核苷酸接在現有核酸的3'端上,所以必須有一段引子先接合到模板股上,DNA聚合酶才能開始合成互補股。 自然界生物細胞中的DNA複製過程,只會使用RNA引子(RNA primer);而人工合成,用來參與生物體外的DNA合成過…
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引子()又称-{zh-cn:引子;zh-tw:引物}-,是一小段單鏈核酸(亦可稱為寡核苷酸),含游离3′-羟基,並可引发聚合反应。引子可為DNA或RNA,參與DNA複製的起始步驟。DNA複製過程中,由於DNA聚合酶只能將核苷酸接在現有核酸的3'端上,所以必須有一段引子先接合到模板股上,DNA聚合酶才能開始合成互補股。 自然界生物細胞中的DNA複製過程,只會使用RNA引子(RNA primer);而人工合成,用來參與生物體外的DNA合成過…
Ori指的是脫氧核糖核酸序列上有一个固定的复制起始点,有时也被叫做origin。在原核生物中,如大肠杆菌(E.coli)的DNA序列上,在第82等分位点上,便存在有该复制起始点,该点被称作OriC。该OriC的DNA跨度为245bp,分析它的碱基序列,可以发现这段DNA是由3组延续的重复序列与2对反向的重复序列所组成的。 在细菌的接合生殖过程中,在oriT ('T'是transfer的缩写) 的FAT质粒序列上开始以滚环式复制的模式进行…
端粒酶()是一种由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白复合体,属于反转录酶,与端粒的调控机理密切相关。人类的端粒酶亚单位基因已被複製出来,分别是端粒酶RNA(hTR)、端粒酶结合蛋白(hTP1)、端粒酶活性催化单位(hTERT)。它以自身的RNA作为端粒DNA复制的模板,合成出富含脱氧单磷酸鸟苷(Deoxyguanosine Monophosphate,dGMP)的DNA序列后添加到染色体的末端并与端粒蛋白质结合,从而稳定了染色体的结构。但是…
解旋酶(英語:Helicases)又稱解链酶,是所有生物體維持生命所必需的一類酶,可分為多種類型。這類酵素是能夠依循核酸磷酸雙酯骨架(phosphodiester backbone)的方向性,而往特定方向移動的馬達蛋白(motor protein)。移動過程中可將相連的兩條核酸長鏈(如DNA、RNA或兩者的混合分子)解開,作用時所需能量來自核苷酸水解。 許多細胞代謝過程(cellular processes),如DNA複製,翻譯,重組,…
在分子生物学中,DNA复制(DNA replication)是指DNA双链在细胞分裂间期阶段进行以一个初始DNA分子产生两个相同的DNA复制品的生物过程。DNA 复制发生在所有真核生物体中,是生物遗传中最重要的机制;除了对于生长和受损组织修复过程中的细胞分裂至关重要,它还确保每个新细胞接收到自己的 DNA 拷贝。 真核細胞的DNA複製發生於細胞核內(粒線體與葉綠體內於基質亦有此現象);原核細胞則發生於細胞質內。 对于双链DNA(即绝大部…
DNA聚合酶(,EC编号:2.7.7.7,全称:脱氧核糖核酸聚合酶),或准确地称DNA指导的/依赖性DNA聚合酶(),是一種參與DNA複製的酶。它主要是以DNA模板的形式,催化脱氧核糖核苷酸的聚合。聚合後的分子將會組成模板鏈並再進一步參與配對。 这些酶催化如下化学反应 :脱氧核苷三磷酸 + DNAn 焦磷酸盐 + DNAn+1. DNA聚合酶以去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、或dTTP,四者統稱dNTPs)為底物,沿模板…
拓撲異構酶(;type I:,type II:)是一種異構酶,能使DNA長鏈斷裂與接合。專門參與DNA拓撲構形(DNA topology)改變的過程,最早的發現者是民國生化學家王倬。 拓撲問題 DNA在結構上主要有三種拓撲構型的變化:超螺旋(supercoiling)、紐結(knotting)與連鎖(catenation)。能夠使DNA在不進行DNA複製與轉錄的時候,盡量維持其緊密性。反之在轉錄或複製過程中,這些拓撲構型將會阻礙反應。 …
*Taq聚合酶(,全称:水生栖热菌聚合酶,简称:Taq酶)是由錢嘉韻于1976年从嗜热细菌水生棲熱菌()中分离出的DNA聚合酶。该酶属于I型。Taq聚合酶的常用缩写有Taq或Taq Pol*。Taq酶常用于放大短DNA片段的聚合酶链式反应中()。 水生棲熱菌生活在温泉与深海热泉中,从其中分离的Taq酶可承受中所需要的高温。因此Taq酶取代了原先用于中的大肠杆菌DNA聚合酶。Taq酶的最适活性温度为75–80°C,在92.5°C时半衰期高…
中節(),是染色体上兩條姊妹分體()相接觸的區域,将染色体分成二臂,主要作用是使复制的染色体在有丝分裂和减数分裂中可均等地分配到子细胞中。在很多高等真核生物中,中節看起来像是在染色体一个点上的浓缩区域,中節包含着丝点(,希腊语kínesis 運動;chóros 部位),着丝点是將染色体和纺锤丝微管相結合的蛋白质复合体,又称主缢痕(primary constriction)。 中節在细胞分裂前期和中期,把两个姐妹染色单体连在一起,到后期两…
梅瑟生-史達實驗(Meselson-Stahl experiment)是馬修·梅瑟生(Matthew Meselson)與富蘭克林·史達(Franklin Stahl)在1958年所作的實驗,該實驗證明了由華生及克里克所提出的DNA複製的半保留性質假說。在半保留複製中,當雙鏈DNA螺旋被複製時,兩個新的雙鏈DNA螺旋中的每一個都由一條來自原始螺旋的鏈和一條新合成的鏈組成。此實驗被稱為「生物學中最美的實驗」。 實驗過程與結果 氮是DNA的…
引发酶(,或译導引酶、引子酶、引物酶)是指在DNA复制的起始阶段,合成单链RNA引物的一种依赖DNA的RNA聚合酶,全名又称DNA引发酶;RNA引物合成后,DNA聚合酶会沿着引物继续合成单链DNA(延伸),此后RNA引物片段会被外切酶5'到3'方向切除。 引发酶催化一个称为引物的短RNA(或某些生物的DNA)片段的合成,并与单链DNA模板互补。引发酶是DNA复制起始阶段的关键酶之一,因为没有任何已知DNA聚合酶能在没有起始引物的情况下合…
复制子()是指 DNA 分子或 RNA 分子中,含有一个复制起始点,能独立进行复制的最小功能单位,可为一个完整核酸分子或核酸分子上的某段区域。若核酸分子具有“多个”复制起始点,且均能独立复制,则此分子具有“多个”复制子。 原核生物 对于大多数原核生物的染色体来说,复制子就是整条染色体。古细菌中有一个例外:两个硫化叶菌属物种被证实有三个复制子。还有一些被发现有多个复制子的细菌的例子:(Rhodobacter sphaeroides) (2…
DNA聚合酶III(),是原核生物进行DNA复制时主要使用的一种酶。该酶于1970年由发现。这种酶複合物具有很强的持续合成能力。作为DNA复制的主要酶,DNA聚合酶III能以外切酶的形式从3'端到5'端运作以纠正复制过程中的错误。DNA聚合酶III是複製體的组成成分之一,其位于複製分叉处。 参考文献
克列诺片段(Klenow fragment)或称克列诺酶(Klenow enzyme),是汉斯·克列诺1970年用枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)处理大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ时,得到的两个片段中分子量较大的一个,它含有605个氨基酸残基(324~928),并有大小两个结构域,其中大结构域(518~928)具有5'→3'聚合酶和3'→5'外切酶活性,小结构域(324~517)则具有5'→3'外切酶活性。 exo-Klenow片段 在一…
DNA聚合酶I(DNA polymerase I;Pol I)是最早发现的一种DNA聚合酶(也是最早发现的聚合酶),於1956年由阿瑟·科恩伯格()从大肠杆菌中分离出,被 Kornberg 发现具有在体外催化DNA合成的性质,故又称 Kornberg 酶。Pol I 由928个氨基酸残基组成,大小约109000,只含一条肽链。除具有5'→3' DNA聚合酶活性外,还有5'→3'和3'→5'的外切核酸酶活性。 另见 DNA聚合酶II DN…