三羟甲基氨基甲烷

三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,常简称Tris)是有机化合物,分子式(HOCH2)3CNH2,广泛用于制备生物化学和分子生物学实验的缓冲液,如生物化学实验常用的TAE和TBE缓冲液(用于溶解核酸)都要用Tris。它有氨基,可与醛缩合反应。

缓冲特性
弱碱,室温(25℃)酸度係数8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液有效缓冲范围在酸醶值7.0到9.2之间;水溶液酸醶值10.5左右,一般加入盐酸调至所需pH值,即可获得该pH值的缓冲液,但同时应注意温度會影响Tris的pKa。

衍生缓冲液
Tris缓冲液是弱碱,会脫去DNA的质子提高其溶解性。人们常在Tris盐酸缓冲液加入EDTA制成TE缓冲液,可用于稳定和储存DNA。将调节pH值的酸换成乙酸可获得TAE缓冲液(Tris/Acetate/EDTA),换成硼酸就可获得TBE缓冲液(Tris/Borate/EDTA);这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验。

制备
可由两步反应生成:先由硝基甲烷生成三羟甲基硝基甲烷((HOCH2)3CNO2),再还原得到Tris。

用途
Tris缓冲液不仅广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途:

  • 用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长
  • Tris缓冲液离子强度低,可用于形成线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维
  • 蛋白质电泳缓冲液主要成分之一
  • 制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物
  • 用作滴定标准

参考文献

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