RIPA裂解液(,全称放射免疫沉淀法缓冲液)是一种用于裂解细胞或组织的,常用于放射性免疫沉淀分析(RIPA)。此缓冲液的变性性能比或曲拉通X-100裂解缓冲液更强,因为它包含离子型去垢剂SDS和脱氧胆酸钠作为破坏核膜,提取核内物质的活性成分。RIPA缓冲液在实验时能提供低的背景,但也会使激酶变性。
配方
用于提取总蛋白质的RIPA缓冲液配方如下:
- 25mM Tris (也可以用10mM 磷酸缓冲液来代替)pH值为7-8
- 150mM 氯化钠
- 0.1% SDS(可选)
- 0.5%的 脱氧胆酸钠
- 1%的Triton X-100或 NP-40
- 蛋白酶抑制剂,例如苯甲基磺酰氟(PMSF)或其它蛋白酶抑制剂(根据试剂商提供的说明使用)。
参考文献
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