锌指核酸酶(),是人工改造的限制酶,通过融合锌指结构的结合DNA结构域和分解DNA结构域而成。可通过基因工程改造锌指结构域使锌指核酸酶针对复杂基因组里的特定DNA序列。借助内源DNA的修复机制,锌指核酸酶可以精确改变高等动物的基因组。類似的技術還有類轉錄活化因子核酸酶。
结构域
锌指核酸酶是一种特定于位点的核酸限制内切酶
功能:设计在特定的位置来结合并分解DNA,含有两个蛋白质结构域。
第一个结构域是DNA结合结构域,其由真核转录因子并包含锌指所构成;第二个结构域是核酸酶结构域,它由FokI限制酶构成,并负责DNA的催化分解。
分解DNA结构域
技术已经用来提高用于ZFNs核酸酶域的活性和特异性。直接进化被用来产生FokI的多样性以增强被作者称为"Sharkey"的 分解活性。通过修改二聚化的接口以便只有目的异二聚体类型有活性,基于结构的设计也被用来提高FokI的分解特异性。
结合DNA结构域
应用
去除一个等位基因
等位基因编辑
基因治疗
潜在问题
脱靶分解
免疫原性
前景
锌指切口酶
锌指核酸酶治疗HIV
锌指结合
核酸酶二聚化和分离
CCR5突变的介绍
局限性
治疗措施
参见
*锌指结构
*基因打靶
*锌指蛋白
*
*蛋白质工程
参考文献
延伸阅读
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外部链接
- [http://www.scripps.edu/mb/barbas/zfdesign/zfdesignhome.php Zinc finger selector]
- [http://www.zincfingers.org Zinc Finger Consortium website]
- [http://www.addgene.org/zfc Zinc Finger Consortium materials from Addgene]
- [http://www.compozrzfn.com/ A commercial supplier of ZFNs]
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